Pharmaceutical Technology Brasil Ed. 1-19

Pharmaceutical Technology 29 Edição Brasileira - Vol. 23 / Nº1 medidos por OD600, e pesos de células secas são apresentados na Figura 5. As fermentações foram realizadas por mais de 60 horas, e as densidades das células excederam uma OD600 de 200. Os resultados são altamente comparáveis entre os fermen- tadores ambr® 250 modulares e de escala de bancada de cinco litros, apesar do fato de o processo ter um requisito de oxigênio extremamente alto. Conclusão A biotecnologia industrial é uma grande promessa para a pro- dução eficiente de produtos químicos que podem ser difíceis de fabricar com outros métodos, desde produtos farmacêuticos até combustíveis. Um desafio importante durante o desenvolvimento dos processos de fermentação é a geração e seleção de clones que expressam a proteína catalítica-alvo e geram altos rendimentos. A Ingenza está abordando essa necessidade com sua plataforma patenteada de biologia sintética. Para acelerar o desenvolvimento e a otimização de processos de fermentação robustos e escalonáveis, bem como a seleção de clones, a empresa está usando o sistema modular ambr® 250 da Sartorius Stedim Biotech. A Ingenza foi capaz de demonstrar que fermentações de E. coli com alta densidade celular podem ser realizadas no sistema e que os resultados replicam o crescimento celular e desempenho de expressão de fermentadores de cinco litros. Além disso, o sistema permite que as fermentações auto- máticas sejam realizadas em paralelo, o que permite a otimização dos parâmetros do processo, como a concentração de biomassa, de maneira conveniente, econômica e pontual. A Ingenza também desafiou o sistema modular ambr® 250 com dois processos que têm alta demanda de oxigênio, alta fermentação da densidade celular de E. coli e uma cultura de P. pastoris . Em ambos os casos, os resultados dos sistemas de minibiorreatores de 250 ml foram comparáveis com os do fermentador de bancada de cinco litros. Uma comparação do crescimento e produtividade de E.coli nos fermen- tadores modulares ambr®250 y 5 l. (a) perfis de crescimento de E. coli (b) objetivo proteico. Níveis de expressão por SDS-PAGE. FIGURA 2 Otimização do ponto de indução dos fermentadores de E. coli alimentos com alta densidade celular utilizando o sistema modular ambr® 250 FIGURA 3 Em conclusão, o ambr® 250 modular é uma ferramenta útil para o desenvolvimento e otimização de uma gama de fermen- tações de biotecnologia industrial, que atendem às necessidades dos vários clientes da Ingenza n Referências 1. Zoro, B. Micro-scale Bioreactors in Fed-batch Microbial Screening. BioPharm Int, 2016, 29(8), 6-10. 2. 2. De Wilde, D. et al. Superior Scalability of Single-Use Bioreactors. BioProcess Int, 2014, 12(8), 14-19. Agradecimentos: Os autores agradecem o apoio prestado pela equipe de fermentação da Ingenza e pela equipe da Sartorius Stedim Biotech, em Royston, no Reino Unido, para esses experimentos. Eles também reconhecem a ajuda de Nick Hutchinson na preparação deste manuscrito. Uso do sistema modular ambr® 250 para fermentadores de E. coli de alta densidade celular FIGURA 4 Uso do sistema modular ambr® 250 para fermentadores de P. pastoris com uma demanda de oxigênio muito alta FIGURA 5 a) b) Réplicas d fermentador de 5 L Rodada 1 de sistema modular ambr® 250 Rodada 2 de sistema modular ambr® 250 Tempo (h) Réplicasde fermentadorde5L Rodada 1 ambr Rodada 2 ambr induzido em OD de 50 induzido em OD de 50 induzido em OD de 70 induzido em OD de 80 Tempo (h) fermentador 5 L OD fermentador 5 L WCW OD ambr250 (150 ml) WCW ambr250 (150 ml) fermentador 5 L DCW DCW ambr250 (150 ml) Tempo (h) fermentador 5 L OD fermentador 5 L WCW OD ambr250 (150 ml) WCW ambr250 (150 ml) fermentador 5 L DCW DCW ambr250 (150 ml) Tempo (h)